טוהר 99%, HPLC ותעודת אנליזה: מה זה אומר ואיך מזהים פפטיד מזויף

למה בכלל צריך לבדוק?

כמו שהסברנו במאמר מה זה פפטידים, בתהליך הייצור עלולים להיווצר תוצרי לוואי: שרשראות קצרות מדי, שרשראות עם חומצת אמינו חסרה או כפולה, ושאריות של חומרים מהתהליך. כל אלה נראים בדיוק כמו הפפטיד הרצוי: אבקה לבנה. בעין אי אפשר לדעת מה יש בבקבוקון, ולכן צריך בדיקת מעבדה.

HPLC: כמה מהחומר הוא הפפטיד

HPLC, כרומטוגרפיה נוזלית בלחץ גבוה, מפרידה בין הרכיבים של הדגימה. הדגימה מוזרמת דרך עמודה דקה, וכל רכיב עובר בה בקצב קצת אחר. גלאי בקצה העמודה רושם כל רכיב שיוצא ממנה, והתוצאה היא גרף שנקרא כרומטוגרמה.

בכרומטוגרמה כל רכיב מופיע כפסגה. בדגימה טובה יש פסגה אחת גדולה, של הפפטיד, וכמה פסגות קטנות של תוצרי לוואי. הטוהר מחושב כשטח הפסגה הראשית מתוך השטח של כל הפסגות יחד. כשכתוב טוהר 99.5%, המשמעות היא שהפסגה הראשית היא 99.5% מכל מה שהגלאי זיהה.

אבל HPLC לבדה לא מספיקה. היא מראה שיש בדגימה רכיב אחד דומיננטי, אבל לא אומרת מהו. גם חומר אחר לגמרי יכול להופיע כפסגה אחת נקייה ויפה.

MS: האם זה באמת הפפטיד הנכון

ספקטרומטריית מסות (MS) מודדת את המסה של המולקולה. לכל פפטיד יש מסה מולקולרית ידועה שנגזרת מהרצף שלו. אם המסה שנמדדה תואמת למסה הצפויה, זה אישור טוב שזה החומר הנכון. בקיצור: HPLC עונה על השאלה כמה נקי, ו-MS על השאלה מה זה.

טוהר הוא לא כמות

זו אחת הנקודות שהכי מבלבלות. אבקת פפטיד מכילה, מלבד הפפטיד עצמו, גם מעט מים ומלחים שנשארים מהייצור, למשל TFA או אצטט. הם לא נספרים בבדיקת הטוהר, כי הגלאי לא רואה אותם.

לכן בקבוקון יכול להיות בטוהר 99% ועדיין להכיל פחות פפטיד ממה שכתוב על התווית. אם על התווית כתוב 10 מ"ג, השאלה כמה מתוכם הם פפטיד בפועל נבדקת בבדיקה נפרדת של כמות (Net Peptide Content). תעודה טובה מציגה את שתי התוצאות.

איך קוראים תעודת אנליזה (COA)

תעודת אנליזה היא המסמך שמסכם את בדיקות המעבדה של אצווה מסוימת. כשאתם מקבלים תעודה, כדאי לבדוק:

• שם המוצר והכמות המוצהרת: תואמים למה שהזמנתם.
• מספר אצווה: מופיע בתעודה ותואם למספר שעל הבקבוקון.
• תאריך הבדיקה: עדכני וברור.
• שם המעבדה: עדיף מעבדה חיצונית ועצמאית, ולא בדיקה של המוכר עצמו.
• תוצאת HPLC: עם הכרומטוגרמה עצמה, ולא רק מספר.
• תוצאת MS: המסה שנמדדה מול המסה הצפויה.
• כמות שנמדדה: כמה פפטיד נמצא בפועל בבקבוקון.

את תעודות הבדיקה של האצוות שלנו אפשר לראות בעמוד בדיקות מעבדה ובעמוד של כל מוצר.

סימני אזהרה

• אין מספר אצווה, או שאותה תעודה מוצגת לכל המוצרים.
• יש רק מספר טוהר, בלי כרומטוגרמה ובלי שם מעבדה.
• התאריך ישן מאוד, או שאין תאריך בכלל.
• אין בדיקת MS, או שהמסה שנמדדה לא תואמת לפפטיד.
• המחיר נמוך בהרבה מהמקובל בשוק.
• המוכר לא מוכן לשלוח תעודה לאצווה שקיבלתם.

אף סימן לבדו לא מוכיח שהמוצר מזויף, אבל כמה סימנים יחד הם סיבה טובה לעצור ולשאול שאלות. עוד על קבלת המשלוח ובדיקת האריזה תמצאו במדריך.

חשוב לדעת: המאמר נועד למידע כללי ולהסבר על מחקר שפורסם. הוא אינו ייעוץ רפואי ואינו המלצה לשימוש בחומר כלשהו. המוצרים באתר מיועדים למחקר מעבדתי בלבד ואינם מיועדים לשימוש בבני אדם.